Diacetilo reductasa de tejidos animales; purificación y estudios cinéticos de la procedente de hígado bovino

Resumen

Por primera vez se demuestra la existencia de diacetilo reductasa en tejidos animales. Se ha detectado, por técnicas colorimétricas y espec­trofotométricas, actividad diacetilo reductasa en diversos órganos y tejidos de varias especies de aves y mamíferos, aunque parece ser menos abundante en las células animales que en las bacterias. Intracelulannente se distri­buye con preferencia en la fracción soluble, lo que señala hacia una posible participación en los mecanismos de reoxidación de los piridín-nucleótidos.
La diacetilo reductasa de hígado bovino ha sido purificada parcial­mente por extracción acetónica, precipitación fraccionada con aretona y cromatografía en columna de DEAE-22-celulosa, con rendimientos del 4 % y un factor de multiplicación de la actividad específica de alrededor de 250 respecto a los extractos acuosos originales.
Con muestras purificadas por este procedimiento se ha estudiado el peso molecular del enzima por cromatografía en gel de Sephadex G-100, el mecanismo de la reacción y su reversibilidad, la participación de cofacto­res y la influencia del pH, la temperatura y ·la concentración de enzima, substratos y productos sobre la actividad enzimática.